痰湿壅盛证高血压大鼠模型的建立与评价

摘要：目的 观察痰湿壅盛证高血压模型大鼠的证候表现、理化指标及可能的病理机制.方法 50只Wistar大鼠采用高脂饲料饲养的方法制备痰湿壅盛证大鼠模型,同时设对照组(10只),给予普通饲料饲养.两组均持续饲养25周后,选取造模大鼠中体重、血压均超过对照组平均值25％的大鼠纳入模型组(22只).检测两组大鼠体重、血压、血脂及相关血清学指标;观察靶器官形态变化;采用实时荧光定量PCR(q-PCR)检测主动脉中瘦素受体(leptin receptor,LepR)、Janus蛋白络氨酸激酶2(Janus kinase2,Jak2)、信号转导子和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,Stat3)、细胞因子信号抑制蛋白-3(suppressor of cytokine signaling-3,Socs3)、血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensin Ⅱreceptor type 1,AT1)、AT2、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、丝苏氨酸蛋白激酶(serine threonine kinase,Akt)、核转录因子kBp65 (nuclear factor of kappa B,NF-κB p65)、核因子kB激酶抑制蛋白α(inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase d,IKKα)、核因子kB抑制蛋白β亚基(NF-kappa-B inhibitor β,IKKβ)、核因子kB抑制蛋白α亚基(NF-kappa-B inhibitor α,IKBα)和磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)mRNA表达水平.根据q-PCR结果,分别采用免疫组化和Western blot检测主动脉中AT1、LepR的表达.结果 与对照组比较,模型组大鼠体重、血压、血脂升高,血清Lep、AngⅡ、同型半胱氨酸(Hcy)、内皮素1(ET-1)、TNF-α、IL-6、β2微球蛋白(β2-MG)升高,NO下降,差异均有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).模型组大鼠主动脉内皮损伤、平滑肌细胞增生,伴发心、肾损害.与对照组比较,模型组大鼠主动脉中LepR、Jak2、Stat3、Socs3、AT1、PI3K、Akt、NF-κB p65、IKKβ、IKBα、AMPK mRNA表达上调(P＜0.05),IKKα下调(P＜0.05).免疫组化显示:模型组AT1和LepR棕黄色沉积明显增多、阳性部位分布更加广泛.Western blot显示:与对照组比较,模型组大鼠主动脉中AT1和LepR蛋白表达增加(P＜0.05).结论 模型大鼠呈现典型的证候特征,体重增加,呈腹形肥胖状态,毛色黯淡,纳呆嗜睡,活动度下降,饮食减少,便溏,舌黯红,苔白厚腻.瘦素可作为评价痰湿壅盛证高血压大鼠模型的客观指标之一.